AIDS - Fakta, naděje: Jak lze prokázat virus HIV?

Virus HIV a jeho přenos

Jak lze prokázat virus HIV?

Metody

V praxi se používá při
depistáži osob infikovaných HIV
nepřímých metod průkazu,
založených na testu ELISA

Přítomnost viru HIV lze prokázat ve vzorku odebrané krve. Průkaz se provádí nejčastěji nepřímými metodami, umožňujícími detekci protilátek vytvořených organismem jako odpověď na přítomnost viru, nebo méně často přímými metodami, umožňujícími průkaz samotného viru nebo některé z jeho složek.

Nepřímé metody
	Tyto metody (jako například ELISA) umožňují průkaz protilátek jako odpověď na přítomnost viru, nikoli však průkaz viru samotného nebo jeho složek
Přímé metody
	1. Izolace samotného viru z lymfocytů představuje velmi nákladnou techniku, jejíž použití je vyhrazeno pouze pro výzkumné účely.
	2. Průkaz virového antigenu se provádí přímo v séru. Přítomnost antigenů v krvi je zjistitelná záhy po infekci, ale pouze po přechodnou dobu. Antigeny totiž zpravidla zmizí, jakmile se objeví protilátky, a objevují se znovu v období rozvinutého onemocnění.
	3. PCR: A nakonec jedna z nejnovějších technik označovaná jako PCR (z anglického Polymerase Chain Reaction), založená na amplifikaci části genetického materkálu HIV (DNA), a to až milionkrát. Tato metoda umožní prokázat přítomnost i velmi malého množství viru v krvi. V současné době se PCR provádí pouze v Národní referenční laboratoři v Praze.

ELISA

Provedení techniky ELISA vyžaduje zpravidla několik hodin. Dnes jsou však již k dispozici rychlé diagnostické testy, pomocí nichž obdržíme výsledek do několika minut. Tyto výsledky je však třeba ověřit, neboť jsou nepřesné. Dále se testy, které dnes máme k dispozici, vyznačují stále vyšší citlivostí a specifitou. Umožňují tedy dřívější průkaz sérokonverze (vzestup hladiny protilátek), ke které dochází po infekci virem.

Neinfikovaný člověk		Infikovaný člověk


sérum bez protilátek (AB)		sérum s proti látkami (AB)

	jamky v mikrotitrační destičce s virovým antigenem (AG)

	bez reakce	komplex AB-AG

	bezbarvá tekutina	zabarvená tekutina
TEST JE NEGATIVNÍ		TEST JE POZITIVNÍ

Test ELISA

Při vyšetření se pacientovi odebere vzorek krve. Z odebraného vzorku se připraví sérum (část, která se získá z krve po odstranění červených krvinek.
Sérum se nanese do malých jamek v mikrotitračních destičkách, které obsahují virový antigen (AG) - složku viru.
Pokud jsou v sérmu obsaženy protilátky (AB) proti viru HIV, dojde k navázání AB na AG za vzniku komplexu AG-AG.
Chemickou reakcí se komplex AB-AG zabarví. Intenzita zabarvení je úměrná hladině přítomných protilátek.
Zabarvení signalizuje pozitivitu testu, zatímco bezbarvá kapalina v destičce znamená, že výsledek testu je negativní.

Kdy je člověk označen za séropozitivního?

Samotný pozitivní výsledek testu ELISA ještě nestačí k tomu, aby byl člověk označen za séropozitivního. Je nutno přistoupit k dalšímu ověření výsledku, aby se zcela vyloučil možný omyl. Obvykle se přitom postupuje podle následujícího protokolu:

	Test ELISA se opakuje dvakrát se stejným vzorkem krve	Výsledek obou testů je negativní	Séro- negativní
		Výsledek obou testů je pozitivní nebo se výsledky rozcházejí

druhý odběr krve	pozitivní výsledek	Ověření výsledku pomocí testu Western blot, který se vyznačuje vyšší specifitou	Séro- negativní
		Druhý vzorek se testuje pomocí techniky Western blot	Séro- pozitivní

Pokud se při druhém testu u vzorku z druhého odběru zjistí pozitivní výsledek, je pacient označen jako séropozitivní.

Novorozenci
séropozitivní
při narození

Může se vyskytnout i falešná pozitivita?
Při použití současných testů a předepsaného postupu při ověřování bychom se v praxi s falešnou séropozitivitou již neměli setkat.

Může se séropozitivní pacient stát znovu séronegativním?
Podle současného stupně poznání by k takové situaci moho dojít pouze zcela vyjímečně. Teoreticky není vyloučeno, že by se organismus mohl virové infekce úplně zbavit.
Vzhledem k prostupu mateřských protilátek placentou vykazuje naopak novorozenec, jehořž matka je séropozitivní, v prvních měsících života zpravidla rovněž séropozitivitu. Tato séropozitivita menusí nutně znamenat, že je dítě infikováno virem. Novorozenci, kteří nejsou infikováni virem, se během několika měsíců stanou séronegativními, zatímco děti infikované virem zůstanou séropozitivní.

Může se vyskytnout i falešná negativita?
Falešnou negativitu lze zjistit při testování pacienta, který už je sice infikován virem, ale v jeho organismu se ještě nevytvořily protilátky (to může trvat 3 týdny až 3 měsíce - ve výjmečných případech dokonce 6 měsíců i děle).


Co to znamená být séropozitivní?

1.	Pozitivní výsledek testu znamená, že séropozitivní pacient byl infikován virem HIV. Neznamená to, že se u pacienta již projevují příznaky AIDS.
2.	Séropozitivního člověka je nutno považovat za nosiče viru, který může virus přenést svou krví a sekrety pohlavního ústrojí. Vzhledem k tomu, že infikovaným zůstane takový člově patrně celý život, musí dodržovat určitá pravidla, o kterých se ještě zmíníme, aby snížil riziko, že se u něho vyvine AIDS, a zábránil přenosu viru na další osoby

začátek stránky